Принцип диагностики аллергических болезней состоит в определении повышенной чувствительности организма к тому или иному аллергену. Следовательно, аллерген является обязательным компонентом при постановке любого теста. При выполнении диагностических приемов возможно три различных подхода: 1) реакции целого организма, 2) воздействие аллергена на клетки, участвующие а аллергических реакциях, 3) определение титра аллергических антител.

Реакции целого организма на аллерген. В качестве примера может служить анафилактический шок. Иногда в специализированных центрах проводят так называемые провокационные пробы, т.е. вводят аллерген сенсибилизированному человеку под контролем врача и тем самым вызывают аллергическую реакцию.

Воздействие аллергеном на клетки, участвующие в аллергических реакциях. Проведение такого рода реакций возможно как in vivo, так и in vitro.

Диагностика in vivo.

Метод кожных проб. Пробы можно проводить у сенсибилизированных людей. Жидкий аллерген либо накапывают на предварительно сделанную оспопрививательным ланцетом царапину, либо вводят шприцем внутрикожно. Если имеется повышенная чувствительность к аллергену, на месте постановки пробы через 15—20 мин появляются краснота и отек. Одновременно ставят пробы к 15—20 аллергенам.

Реакция Пpayспица-Кюстнера. При прямой реакции здоровому реципиенту вводят внутрикожно 0,1 мл сыворотки крови больного (содержащие антитела), а через 48 ч (антитела фиксируются на коже) в то же место — экстракт аллергена. При положительной реакции через 20—30 мин развивается типичная кожная реакция. При обратной реакции сначала вводят аллерген, а потом сыворотку. Прямая реакция определяет реагины. Обратная реакция реагиннеспецифична.

Диагностика in vitro.

Воздействие на пейтрофилы — при инкубации нейтрофилов сенсибилизированного человека с аллергеном отмечаются потеря амебоидной активности нейтрофилов (показатель повреждаемости нейтрофилов по В.А. Фрадкину), внутриклеточные некробиотические изменения (гест альтерации нейтрофилов), лизис клеток (реакция специфического лейколиза).

Воздействие на лимфоциты — реакция бласттрансформации лимфоцитов крови — добавление к культуре лимфоцитов аллергена повышает их митотическую активность, что после 3—7 суток культивирования можно выявить по синтезу ДНК (по включению в клетки Н-тимидина), либо по морфологическим показателям (делящиеся лимфоциты изменяют свою морфологию и начинают напоминать бластные клетки).

Воздействие на базофилы — под влиянием аллергена наблюдается дегрануляция базофилов.

Реакция торможения миграции лейкоцитов крови — аллерген тормозит миграцию лейкоцитов сенсибилизированного к этому аллергену человека.

Реакция дегрануляции тучных клеток — под влиянием аллергена. Механизм реакции описан при изложении патогенеза реакций 1-го типа.

Определение титра аллергических антител, радиоиммунологический тест. Аллерген, к которому подозревают сенсибилизацию, фиксируют на полимере (например, нерастворимый декстран), в результате образуется нерастворимый полимер-аллергениый конъюгат, который добавляют к исследуемой сыворотке крови больного. Если в сыворотке крови присутствуют специфические антитела, возникает реакция антиген — антитело. Затем, после удаления из системы всех несвязанных в реакции компонентов, к конъюгату добавляют порцию специально приготовленной моноспецифической сыворотки, содержащей антитела против IgE, которые до этого метятся одним из радиоактивных изотопов (например, 125I). Добавление меченых антител создает условие для новой специфической реакции с антителами IgE, находящимися в сыворотке больного. Измеряя радиоактивность комплекса, оценивают титр IgE.